Đề tài Phát hiện một số gen độc lực của E.coli phân lập được từ phân bón và thịt bò heo bằng kỹ thuật multiplex - PCR

Qui trình phân lập vi khuẩn E. coli

- Từ mẫu thịt và mẫu phân bình thường, vi khuẩn E. coliđược phân lập,

định lượng theo qui trình FAO (1992).

- Mẫu phân bê và heo con tiêu chảy được cấy ria trực tiếp trên môi trường

EMB hoặc MAC, ủ ở 37oC trong 24 giờ. Khuẩn lạc E. coliđiển hình trên môi

trường EMB sẽ dẹp, có màu tím ánh kim với tâm sậm màu, và trên môi trường

MAC có màu hồng, tròn, lồi.

- Mẫu bề mặt quày thịt (200 cm2) được làm đồng đềutrong 180 ml pepton

đệm phosphate và dập mẫu trong 60 giây. Bổ sung kháng sinh cefixime với nồng

độ 0,0125 mg/l (FDA, 2002). Ủ ở 37oC trong 24 giờ. Pha loãng canh tăng sinh 10

lần với nước sinh lý vô trùng. Hút 100 µl canh tăng sinhở nồng độ 10-1dàn đều

lên bề mặt đĩa thạch CT-SMAC. Ủ ở 37oC trong 24 giờ. Vi khuẩn E. coli

O157:H7 điển hình thường phát triển trên môi trường CT-SMAC tạo khuẩn lạc

không màu hoặc màu xám với tâm đục.