Khóa luận Ảnh hưởng của nồng độ BSA (Bovine Serum Albumin) trong môi trường nuôi cấy lên khả năng phát triển của phôi chuột giai đoạn trước làm tổ

Mục lục

Trang

Đặt vấn đề1

Tổng quan tài liệu

I. SINH SẢN TRÊN CHUỘT 2

I.1. Nội tiết sinh sản 2

I.2. Sự phát triển và trưởng thành của trứng 2

I.3. Sự rụng trứng 2

I.4. Sự thụ tinh 3

I.5. Sự phát triển của phôi chuột giai đoạn sau làm tổ 3

I.6. Các giai đoạn phát triển chính của phôi chuột 5

II. QUY TRÌNH TẠO PHÔI - THU NHẬN VÀ NUÔI CẤY . 6

II.1. Quy trình giao phối tự nhiên 6

II.1.1. Sự thụ tinh trong cơ thể (in vivo) 7

II.1.2. Sự thụ tinh trong ống nghiệm (in vitro) 7

II.2. Kích thích buồng trứng (superovulation) 8

II.3. Các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả của kích thích . 8

II.3.1. Ảnh hưởng của tuổi và trọng lượng 8

II.3.2. Liều kích dục tố 8

II.4. Thu nhận phôi 9

II.4.1. Block (sự kiềm hãm) ở giai đoạn 2 tế bào 10

II.4.2. Phôi dâu 10

II.4.3. Phôi nang 10

III. MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY PHÔI GIAI ĐOẠN TRƯỚC . 11

III.1. Lịch sử nghiên cứu môi trường 11

III.2. Các loại môi trường nuôi cấy phôi động vật có vú 12

III.3. Các thành phần chính trong môi trường nuôi cấy phôi chuột 13

III.3.1. Nước 13

III.3.2. Ion 13

III.3.3. Carbohydrate 13

III.3.4. Amino acid 14

III.3.5. Chất bắt giữ kim loại nặng 15

III.3.6. Chất chống oxi hóa 15

III.3.7. Kháng sinh 16

III.3.8. Protein/Các đại phân tử 16

III.3.9. Ammonium 17

IV. THỂ TÍCH Ủ 17

V. KHÔNG KHÍ 18

VI. ALBUMIN HUYẾT THANH BÒ 18

VI.1. BSA 18

VI.2. BSA và sự tổng hợp BSA trong cơ thể động vật có vú 19

VI.3. Thành phần amino acid trong BSA 19

VI.4. Đặc tính chức năng của BSA 20

VI.4.1. Tạo bọt 20

VI.4.2. Khả năng đông đặc của BSA 20

VI.4.3. Phối tử kết nối 21

VI.5. Những nghiên cứu về vai trò của BSA trong . 21

VII. ỨNG DỤNG THỰC TIỄN 23

Vật liệu – Phương pháp

I. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 25

II. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25

III. DỤNG CỤ – THIẾT BỊ – HOÁ CHẤT 25

IV.1. Dụng cụ 25

IV.2. Thiết bị 26

IV.3. Hoá chất 26

IV. QUY TRÌNH THÍ NGHIỆM 27

IV.1. Ổn định chuột – kích thích buồng trứng – phối 29

IV.2. Mổ chuột – thu nhận phôi 2 tế bào 31

IV.3. Theo dõi sự phát triển của phôi và ghi nhện kết quả 36

V. ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ 37

Kết quả – Biện luận

I. KẾT QUẢ 40

I.1. Đặc điểm lô thí nghiệm nghiên cứu 40

I.2. Kết quả thí nghiệm ảnh hưởng của nồng độ BSA . 42

I.3. Kết quả thí nghiệm ảnh hưởng của số lượng phôi/ 50µl . 43

I.4. Kết quả thí nghiệm ảnh hưởng trong kích thích buồng trứng 45

I.5. Kết quả thí nghiệm ảnh hưởng của nguồn chuột và . 45

I.6. Kết quả thí nghiệm kiểm tra vai trò của nút nhầy âm đạo . 45

II. BÀN LUẬN 47

Kết luận – Đề nghị

I. KẾT LUẬN 51

II. ĐỀ NGHỊ 52

Tài liệu tham khảo53

Phụ lục 1

Phụ lục 2