Luận văn Bước đầu nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật sinh học phân tử để phân biệt một số loài sâm thuộc chi panax
MỤC LỤC MỤC LỤC.i CHỮVIẾT TẮT .iv DANH MỤC BẢNG.v DANH MỤC HÌNH .vi DANH MỤC HÌNH .vi MỞ ĐẦU.1 Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 1.1 Tổng quan vềchi Panax .3 1.1.1 Đặc điểm . 3 1.1.2 Phân loại . 4 1.1.3 Thành phần hóa học . 6 1.1.3.1 Hợp chất saponin . 6 1.1.3.2 Hợp chất polyacetylen . 8 1.1.4 Tác dụng dược lý . 10 1.2 Hệthống học mức phân tửcủa Panax .13 1.3 Các phương pháp phân biệt loài dựa trên DNA .13 1.3.1 Các phương pháp dựa trên PCR . 14 1.3.1.1 PCR-Đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn (PCR-RFLP) . 14 1.3.1.2 Đa hình chiều dài đoạn DNA nhân bản (AFLP) . 14 1.3.1.3 PCR mồi ngẫu nhiên (RP-PCR) . 15 1.3.1.4 Vi vệtinh khuếch đại ngẫu nhiên (RAMS) . 16 1.3.2 Các phương pháp dựa trên sựlai . 17 1.3.3 Các phương pháp dựa trên giải trình tự. 18 1.4 Chiết tách, phân tích sơbộDNA .18 1.4.1 Chiết tách DNA. 18 1.4.2 Các phương pháp phân tích sơbộaxit nucleic . 19 1.4.2.1 Đo quang phổ. 19 1.4.2.2 Điện di . 20 Chương 2. VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU.23 2.1 Vật liệu .23 2.1.1 Đối tượng . 23 2.1.2 Dụng cụ, vật liệu - hóa chất . 24 2.1.3 Mồi . 25 2.1.4 Trang thiết bị- dụng cụ. 25 2.2 Phương pháp nghiên cứu.26 2.2.1 Phương pháp sắc kí lớp mỏng . 26 2.2.2 Chiết tách DNA. 26 2.2.3 Phát hiện DNA: Phương pháp điện di gel agarose . 28 2.2.4 Thực hiện các phản ứng PCR . 28 2.2.4.1 Thiết lập RAMS . 29 2.2.4.2 Thiết lập ITS . 29 2.2.4.3 Thiết lập 18S. 30 2.2.5 Tinh sạch sản phẩm PCR . 30 2.2.6 Thực hiện RFLP. 30 2.2.7 Giải trình tự. 31 Chương 3. KẾT QUẢNGHIÊN CỨU .32 3.1 Các mẫu Panax .32 3.2 Phương pháp sắc kí lớp mỏng .33 3.3 Chiết tách DNA .34 3.4 Kết quảPCR .35 3.4.1 Vùng ITS. 35 3.4.2 Vùng 18S . 35 3.5 Kết quảgiải trình tự.36 3.5.1 Vùng ITS. 36 3.5.2 Vùng 18S . 37 3.6 Phân tích RFLP .40 3.6.1 Vùng ITS. 40 3.6.2 Vùng 18S . 41 3.7 Phân tích RAMS.43 3.7.1 Xác lập điều kiện tiến hành. 43 3.7.1.1 Lựa chọn mồi và nhiệt độgắn mồi thích hợp. 43 3.7.1.2 Dò tìm nồng độMg2+thích hợp . 44 3.7.2 Tiến hành RAMS . 44 3.7.3 Phân tích bằng Bionumeric . 45 Chương 4. BÀN LUẬN .46 KẾT LUẬN VÀ ĐỀNGHỊ.48 TÀI LIỆU THAM KHẢO.49
Các file đính kèm theo tài liệu này:
- 7.pdf
- 1_2.pdf
- 2_2.pdf
- 3.pdf
- 4.pdf
- 5_2.pdf
- 6_4.pdf
- 8.pdf
- 9.pdf
- 10_3.pdf
- 11.pdf
- 12.pdf
- 13.pdf
- 14.pdf