Luận văn Thu nhận enzym papain để ứng dụng vào phản ứng thủy phân protein trong bánh dầu đậu phộng
MỤC LỤC
MỞ ĐẦU . 1
Chương 1 TỔNG QUAN . 2
1.1 GIỚI THIỆU VỀ ENZYME PAPAIN . 2
1.1.1 Cysteine protease . 2
1.1.2 Papain . 2
1.1.2.1 Nguồn gốc . 2
1.1.2.1.1. Giới thiệu về cây đu đủ. . 3
1.1.2.1.2. Phân bố sinh thái của cây đu đủ. . 4
1.1.2.1.3. Hoạt tính sinh học và công dụng của một số chất có trong
cây đu đủ . 4
1.1.2.2 Tính chất của papain . 5
1.1.2.2.1 Tính chất vật lý . 5
1.1.2.2.2 Tính chất hóa học . 5
a) Cấu tạo hóa học . 5
b) Cấu trúc không gian . 6
c) Cấu trúc tâm hoạt động của papain . 7
d) Phản ứng của papain . 7
e. Các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính xúc tác của papain . 9
1.1.2.3 Ứng dụng của enzyme papain . 10
1.1.2.3.1 Trong y học: . 10
1.1.2.3.2 Trong công nghiệp thực phẩm: . 10
1.1.2.3.3 Trong các ngành công nghiệp khác: . 10
1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA BÁNH DẦU ĐẬU PHỘNG . 10
1.3 PHẢN ỨNG THỦY PHÂN BÁNH DẦU ĐẬU PHỘNG . 12
1.3.1 Khái niệm phản ứng thủy phân . 12
1.3.2 Quy trình thực hiện phản ứng thủy phân . 13
1.3.3 Các thay đổi hóa sinh trong quá trình thủy phân: . 14
1.3.4 Tính chất của sản phẩm sau thủy phân . 14
1.3.5 Ƣu và nhƣợc điểm của phản ứng thủy phân: . 15
1.3.5.1 Ƣu điểm: . 15
1.3.5.2 Nhƣợc điểm: . 15
1.4 ỨNG DỤNG ENZYME PAPAIN LÀM XÚC TÁC CHO PHẢN ỨNG
THỦY PHÂN PROTEIN TRONG BÁNH DẦU ĐẬU PHỘNG . 15
Chương 2 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP . 17
2.1. HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ . 17
2.1.1. Hóa chất . 17
2.1.2. Thiết bị . 18
2.2 PHƢƠNG PHÁP THỰC HIỆN . 18
2.2.1 Phƣơng pháp trích nhựa đu đủ từ trái. 18
2.2.2 Phƣơng pháp thu nhận papain tinh khiết . 19
2.2.2.1 Loại bỏ các chất không tan ở pH 9. . 20
2.2.2.2 Quá trình phân đoạn bằng amonium sulfate . 20
2.2.2.3 Quá trình phân đoạn bằng NaCl . 20
2.2.2.4 Kết tinh . 20
2.2.2.5 Tái kết tinh . 21
2.2.2.6 Đông khô chân không. . 21
2.2.3 Xác định lƣợng protein theo phƣơng pháp Lowry . 22
2.2.4 Xác định hoạt tính protein theo phƣơng pháp Anson . 23
2.2.5 Xác định đạm tổng số theo phƣơng pháp Kjeldahl . 24
2.2.5.1 Nguyên tắc: . 24
2.2.5.2 Cách tính: . 24
2.2.6 Phƣơng pháp xác định đạm formol (phƣơng pháp Sorensen) . 25
2.2.6.1 Nguyên tắc. 25
2.2.6.2 Tiến hành . 25
2.2.6.3 Cách tính . 26
2.2.7 Xác định đạm amoniac . 26
2.2.7.1 Nguyên tắc. 26
2.2.7.2 Tiến hành . 27
2.2.7.3 Cách tính . 27
2.2.8 Phƣơng pháp chung tiến hành phản ứng thủy phân bánh dầu đậu
phộng với xúc tác papain thô. . 27
2.2.8.1 Phƣơng pháp loại béo: . 27
2.2.8.2 Phƣơng pháp thực hiện phản ứng . 27
2.2.8.3 Hiệu suất thủy phân . 28
Chương 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN . 30
3.1 KHẢO SÁT LƢỢNG NHỰA Ở QUẢ ĐU ĐỦ . 30
3.2 KHẢO SÁT ĐIỀU KIỆN SƠ CHẾ NHỰA TƢƠI . 30
3.3 KHẢO SÁT ĐIỀU KIỆN THU NHẬN PAPAIN TỪ NHỰA KHÔ . 31
3.4 PHƢƠNG PHÁP LOWRY XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG PROTEIN . 33
3.5 PHƢƠNG PHÁP ANSON XÁC ĐỊNH HOẠT TÍNH PROTEASE . 34
3.6 KHẢO SÁT LƢỢNG ENZYME THU ĐƢỢC SAU CÁC GIAI ĐOẠN
TINH CHẾ. . 35
3.7 KHẢO SÁT HOẠT TÍNH CỦA ENZYME SAU CÁC GIAI ĐOẠN
TINH CHẾ . 37
3.8 KHẢO SÁT SỰ BIẾN ĐỔI LƢỢNG PROTEIN TRONG CÁC CHẾ
PHẨM PROTEASE THU ĐƢỢC THEO THỜI GIAN . 39
3.9 KHẢO SÁT SỰ BIẾN ĐỔI HOẠT TÍNH CỦA CÁC CHẾ PHẨM
THEO THỜI GIAN. . 41
3.10 KHẢO SÁT CÁC YẾU TỐ ẢNH HƢỞNG ĐẾN HOẠT TÍNH CỦA
ENZYME PAPAIN. . 44
3.10.1. Khảo sát ảnh hƣởng của pH . 44
3.10.2 Khảo sát ảnh hƣởng của nhiệt độ . 45
3.11 KHẢO SÁT HÀM LƢỢNG ĐẠM FORMOL VÀ AMONIAC THEO
THỜI GIAN TRONG PHẢN ỨNG THỦY PHÂN. . 46
3.12 KHẢO SÁT PHẢN ỨNG THỦY PHÂN BÁNH DẦU ĐẬU PHỘNG
VỚI XÚC TÁC PAPAIN THÔ. . 49
3.12.1. Khảo sát phản ứng thủy phân ở hàm lƣợng xúc tác là 0.25% so
với cơ chất theo thời gian. 50
3.12.2. Khảo sát phản ứng thủy phân ở hàm lƣợng xúc tác là 0.50% so
với cơ chất theo thời gian. 57
3.12.3. Khảo sát phản ứng thủy phân ở hàm lƣợng xúc tác là 0.75% so
với cơ chất . 65
3.12.4. Khảo sát phản ứng thủy phân ở hàm lƣợng xúc tác là 1.00% so
với cơ chất . 72
KẾT LUẬN . 80
Các file đính kèm theo tài liệu này:
5_2.pdf
1_2.pdf
2_2.pdf
3.pdf
4.pdf
6_4.pdf
7.pdf
8.pdf
9.pdf
10_3.pdf